Postopek merjenja mrtvega volumna HPLC sistema
Objavljeno: 4. april 2008
Merjenje mrtvega volumna je koristno rutinsko opravilo v laboratoriju. In postopek ni zapleten.
1. Pripravi 1 % raztopino acetona v metanolu.
2. Odstrani HPLC kolono in kapilari kratko skleni.
3. Kromatografski pogoji:
- mobilna faza: metanol,
- pretok: 1,0 ml/min (izmeri z merilnim valjem in štoparico dejanski pretok),
- valovna dolžina: 254 nm
- volumen injiciranja: 20 mikrolitrov
4. Injiciraj 1% aceton in posnemi kromatogram.
5. Izračunaj mrtvi volumen po naslednji formuli: MV = 1,7 x W x 1000
-MV … mrtvi volumen (v mikrolitrih)
-W … širina odziva acetona na polovici višine (v min)
-1000 … pretok (v mikrolitrih/min)
Koliko je mrtvi volumen vašega HPLC sistema?
Aleš Čerin









